TECNICA DE HEMATOXILINA/EOSINA.

Fijacion: Formaldehido al 10 % según el tamaño de la pieza, de 1 hora a 24 o mas.

 Cortes: de 5 micras por parafina.

 Método

1. Desparafinar los cortes por estufa a 100 grados y retirar el excedente con Xilol por 10 minutos.

2. Eliminar el Xilol con Alcohol absoluto por 1 minuto.
3. Hidratar progresivamente con alcoholes de concentración acuosa progresiva: alcohol de 96% y sucesivos de 80%, 70%, 60% cada uno por 1 minuto hasta el agua corriente.
4. Hematoxilina de Harris por 5 a 10 minutos.
5. Lavar con agua corriente 1 minuto.
6. Quitar exceso del colorante con Alcohol ácido: 10 baños rápidos. Los cortes de un azul intenso adquieren un color rosa violáceo.
7. lavar con agua corrientes: 30 segundos o hasta que adquieran un leve color azul.
8. Solución saturada de Carbonato de Litio: 10 baños o hasta que vire el color de los cortes a azul.
9. Lavar con agua corriente para eliminar el carbonato de litio. 20 a 30 baños.
10. Solucion de Eosina acuosa por 5 minutos.
11. Lavar con agua corriente por 1minuto para quitar el excedo de la Eosina.
12. Deshidratar con alcoholes de concentración creciente hasta el Absoluto.
13. Eliminar el Alcohol con Xilol. Por 1 minuto.
14. Tomar el porta objetos, cubrir el tejido con unas gotas de Resina sintética y aplicar sobre este la delgada laminilla cubre objeto.
15. Secar en la estufa a 50 a 60 grados, para mejor adherencia de los cubre objetos. Por unos 10 minutos.
16. Observar al microscopio de luz.

RESULTADOS. 

Núcleos azul oscuro. (basófilo)

Citoplasma rosa (acidófilo o eosinófilo).

RNA en células que sintetizan proteínas: azul oscuro (basófilo). Gránulos de Nissl de las Neuronas o el ergastoplasma de las células acinares del Páncreas.